

FITC anti-human CD90 (Thy1)(Cat No.:CL-F328107)是一种荧光标记的单克隆抗体,用于检测人类细胞表面的CD90(Thy-1)抗原。
靶标与功能 CD90(Thy-1)是一种糖磷脂酰肌醇(GPI)锚定的细胞表面糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族成员,分子量约25-37 kDa。其功能包括调节细胞黏附、信号传导、免疫反应及肿瘤干细胞的识别等。在流式细胞术中,该抗体通过识别CD90表位,可标记T细胞、成纤维细胞、造血干细胞及多种肿瘤细胞(如肝癌、黑色素瘤等)。
荧光标记与检测
FITC特性:异硫氰酸荧光素(FITC)是一种酸性荧光染料,最大吸收峰为495 nm,发射绿光(520 nm),需用488 nm激光激发。其光子产量高,但荧光强度受pH影响,需在中性环境中使用以保证稳定性。
标记方式:抗体通过共价键与FITC结合,保留了抗原结合活性,适用于流式细胞术、免疫荧光等技术。
免疫表型分析
T细胞分化与成熟:CD90是胸腺T细胞分化的标志物,可用于区分不同发育阶段的T细胞亚群。
肿瘤干细胞研究:CD90⁺细胞在多种癌症(如肝癌、黑色素瘤)中被鉴定为肿瘤干细胞,具有高致瘤性和转移潜能,该抗体可用于筛选和分析此类细胞。
间充质干细胞鉴定:CD90是间充质干细胞(MSC)的核心表面标记之一,常与CD73、CD105联合使用进行鉴定。
疾病诊断与机制研究
炎症与纤维化:CD90在成纤维细胞中的表达与组织修复、纤维化相关,可用于研究病理过程中的细胞表型变化。
肿瘤微环境:CD90在肿瘤相关基质细胞或血管内皮细胞中的高表达可能促进肿瘤进展,抗体可辅助分析其在微环境中的作用。
抗体优化与验证
工作浓度:需通过预实验确定最佳浓度,避免非特异性结合。建议参考说明书或文献推荐浓度(通常为1-10 μg/mL)。
同型对照:使用与抗体相同种属来源(如小鼠IgG1)、亚型的未标记抗体作为阴性对照,排除非特异性染色。
样本处理与染色流程
表面染色优先:若需同时检测表面和胞内抗原,应先完成表面抗体(如CD90)标记,再进行固定和破膜处理(如使用CL-F08824固定破膜液)。
补偿调节:FITC与其他荧光染料(如PE、APC)联用时,需设置补偿以消除光谱重叠。建议使用单标样本调节补偿值,确保数据准确性。
保存与稳定性:抗体需避光保存于-20℃,避免反复冻融。开封后建议分装并短期内使用,以减少效价下降。
荧光信号弱:可能因抗体浓度不足、样本处理不当(如固定时间过长)或荧光淬灭(如甲醇破膜)。建议优化抗体浓度、缩短固定时间或更换兼容的破膜试剂。
非特异性背景高:可增加封闭步骤(如使用含BSA的缓冲液)或延长洗涤时间,必要时更换抗体批次。
多色联用冲突:若与波长相近的荧光染料联用,需通过补偿调节或选择光谱分离度更高的荧光组合(如FITC+PE-CF594)。
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