MMP Assay Kit (with JC-1)（Cat No.：CL-EA3015） 是一种专门用于检测线粒体膜电位（Mitochondrial Membrane Potential, MMP）的试剂盒，通过JC-1荧光探针技术实现对细胞线粒体功能状态的精准评估。
线粒体膜电位检测原理
高膜电位状态：JC-1聚集在线粒体基质中形成红色荧光聚合物（激发波长585 nm，发射波长590 nm），表明线粒体功能正常。
低膜电位状态：JC-1以绿色荧光单体形式存在（激发波长514 nm，发射波长529 nm），表明线粒体去极化，常见于细胞凋亡早期。
JC-1探针特性：JC-1是一种亲脂性阳离子荧光染料，其荧光特性随线粒体膜电位变化而改变。
检测机制：通过红/绿荧光比值变化定量评估线粒体膜电位状态，比值降低表明线粒体功能受损。
试剂盒核心优势
高灵敏度：可检测细胞对刺激的微小反应，如药物诱导的线粒体功能变化。
特异性强：红/绿荧光比值仅受线粒体膜电位影响，不受线粒体大小、形状或密度干扰。
操作简便：无需复杂设备，适用于流式细胞仪、荧光显微镜或酶标仪检测。
标准组分
JC-1染料（200×）：5×100 μL，-20℃避光保存。
JC-1染色缓冲液（5×）：80 mL，-20℃或4℃保存。
CCCP（10 mM）：20 μL，作为阳性对照诱导线粒体膜电位下降。
超纯水：90 mL，用于稀释缓冲液。
标准操作流程
配制工作液：
按比例稀释JC-1染料（如5 μL JC-1 + 995 μL缓冲液）至1×工作液。
细胞处理：
悬浮细胞：取5-10×10⁶细胞，重悬于0.5 mL工作液，37℃孵育20分钟。
贴壁细胞：吸除培养液，加入1 mL工作液，37℃孵育20分钟。
阳性对照设置：
用CCCP（10 μM）处理细胞20分钟，诱导线粒体膜电位完全丧失。
荧光检测：
使用荧光显微镜或流式细胞仪观察红/绿荧光比值变化。
1.关键注意事项
工作液稳定性：JC-1工作液需现配现用，室温避光条件下仅稳定4小时。
样品处理：含还原性物质的样品需设置背景对照，避免染料WST变色影响结果。
保存条件：JC-1染料需-20℃避光保存，避免反复冻融。
2.实验优化建议
预实验：对未知乳酸浓度的样品进行预实验，确定最佳稀释比例。
背景对照：含血清培养基需设置背景对照，提高检测准确性。
荧光检测：优先使用450 nm波长测量，490 nm波长吸光度值较低。
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