αPAK抗体（A-6，Cat No.：sc166887）是Santa Cruz Biotechnology（sc）公司生产的一款针对PAK1（p21-activated kinase 1）蛋白的高特异性抗体，广泛应用于研究PAK1在细胞信号通路、细胞骨架调控及疾病机制中的功能。
一、抗体基本信息
宿主与类型
宿主：兔（Rabbit）
类型：多克隆抗体（Polyclonal Antibody），具有高亲和力和多表位识别能力，适合检测天然构象蛋白。
免疫原与特异性
免疫原：基于PAK1蛋白的全长或关键功能域（如激酶结构域）设计，确保对PAK1的高特异性识别。
特异性：可识别PAK1的天然构象及翻译后修饰形式（如磷酸化），但需结合实验验证其对特定亚型或修饰状态的敏感性。
检测目标
目标蛋白：PAK1（p21-activated kinase 1），属于Rho GTP酶效应蛋白家族，参与细胞迁移、增殖、凋亡及肿瘤发生等过程。
该抗体适用于多种实验技术，推荐条件如下：
| Western Blot (WB) | 1:500–1:2000 | 使用含SDS-PAGE分离胶（建议10%–12%），转膜后封闭（5%脱脂牛奶或BSA），4℃孵育过夜。 |
| 免疫组化 (IHC) | 1:100–1:500 | 适用于石蜡切片或冰冻切片，需结合抗原修复（如柠檬酸缓冲液热修复）。 |
| 免疫荧光 (IF) | 1:100–1:500 | 细胞固定（4%多聚甲醛），封闭后避光孵育，推荐与DAPI共染以定位细胞核。 |
样本处理
组织样本：石蜡切片需脱蜡至水，冰冻切片需避免反复冻融；细胞样本建议新鲜制备或低温保存。
蛋白提取：使用RIPA裂解液提取总蛋白，避免蛋白酶抑制剂不足导致PAK1降解。
实验优化
抗体浓度：建议梯度稀释（如1:500、1:1000、1:2000）以确定最佳工作浓度，避免高浓度背景信号。
封闭与洗涤：充分封闭（30分钟以上）并多次洗涤（TBST洗3次，每次5分钟），减少非特异性结合。
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