GAD1单克隆抗体（Cat No.：CL-PAB676481）是一种针对谷氨酸脱羧酶1（GAD1，也称GAD67）的高特异性抗体，广泛应用于神经科学、代谢疾病及自身免疫性疾病的机制研究。该抗体基于小鼠杂交瘤技术制备，具有高度均一性和稳定性，适用于多种实验技术（如Western Blot、免疫组化、免疫荧光等），是研究GAD1功能及其在疾病中作用的关键工具。
一、抗体基本信息
宿主与克隆类型
宿主：小鼠（Mouse）
克隆类型：单克隆抗体（Monoclonal Antibody），通过杂交瘤技术制备，确保抗体结构均一、特异性高。
免疫原与特异性
免疫原：通常基于GAD1蛋白的全长或关键功能域（如催化区或调节区）设计，确保对GAD1的高亲和力识别。
特异性：可识别GAD1的天然构象及翻译后修饰形式（如磷酸化），但需结合实验验证其对特定亚型或修饰状态的敏感性。
分子量与表达分布
理论分子量：约67 kDa（GAD1蛋白全长）。
表达组织：主要在脑组织（如小脑、海马）和胰岛β细胞中高表达，参与γ-氨基丁酸（GABA）合成及代谢调控。
该抗体适用于多种实验技术，具体推荐条件如下：
| Western Blot (WB) | 1:1000–1:5000 | 使用含SDS-PAGE分离胶（建议10%–12%），转膜后封闭（5%脱脂牛奶或BSA），室温或4℃孵育1–2小时。 |
| 免疫组化 (IHC) | 1:200–1:1000 | 适用于石蜡切片或冰冻切片，需结合抗原修复（如柠檬酸缓冲液热修复）。 |
| 免疫荧光 (IF) | 1:100–1:500 | 细胞固定（4%多聚甲醛），封闭后避光孵育，推荐与DAPI共染以定位细胞核。 |
样本处理
组织样本：石蜡切片需脱蜡至水，冰冻切片需避免反复冻融；细胞样本建议新鲜制备或低温保存。
蛋白提取：使用RIPA裂解液提取总蛋白，避免蛋白酶抑制剂不足导致GAD1降解。
实验优化
抗体浓度：建议梯度稀释（如1:1000、1:2000、1:5000）以确定最佳工作浓度，避免高浓度背景信号。
封闭与洗涤：充分封闭（30分钟以上）并多次洗涤（TBST洗3次，每次5分钟），减少非特异性结合。
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