

主要成分:氯化铵(NH₄Cl)、碳酸氢钾(KHCO₃)、EDTA(乙二胺四乙酸)等,通过渗透压差裂解无核红细胞,保护淋巴细胞等有核细胞。
适用范围:人、小鼠、大鼠等哺乳动物血液或组织样本,不适用于鸟类、鱼类等有核红细胞的裂解。
用途:去除红细胞干扰,用于流式细胞术、核酸/蛋白提取、细胞培养、免疫分析等下游实验。
保存条件:4℃避光保存,有效期通常为1年(部分产品可常温运输,4℃保存)。
灭菌方式:多数产品经过无菌过滤处理,避免污染。
操作温度:室温或4℃均可,部分步骤建议4℃以提高裂解效率。
样本处理:
新鲜抗凝血(如肝素或EDTA抗凝)400-500g离心5分钟,弃上清。
裂解:
加入 6-10倍体积 红细胞裂解液,轻轻混匀。
人血需裂解4-5分钟(小鼠血1-2分钟),期间可间歇摇动促进裂解。
离心:
400-500g离心5分钟,弃红色上清。
洗涤:
用PBS、HBSS或无血清培养液洗涤1-2次,离心后重悬细胞。
后续实验:
细胞可用于流式分析、核酸提取(如RNA需使用DEPC水洗涤)或培养。
无菌操作:避免污染,建议在超净台中操作。
比例调整:特殊样本(如白血病、红细胞增多症)需提高裂解液比例(1:4或更高)。
残留红细胞:微量红细胞通常不影响后续实验,但可通过重复裂解步骤去除。
安全防护:穿戴实验服、手套,避免接触皮肤或黏膜。
基因研究:去除红细胞后提取DNA/RNA,用于PCR或测序。
免疫学:分离白细胞进行流式细胞术或免疫组化。
细胞培养:纯化淋巴细胞用于原代培养或细胞融合实验。
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