

用途:专为细胞内转录因子(如Foxp3、Ki-67)及核蛋白的流式细胞术检测设计,优化了抗体对目标蛋白的染色效果,同时兼容细胞因子和趋化因子的检测1
2
3
。
成分:
Fixation/Permeabilization浓缩液(Cat. 00-5123):30 mL,含甲醛和致癌物,需按1:3比例与稀释液混合使用2
2
5
。
Fixation/Permeabilization稀释液(Cat. 00-5223):100 mL,用于稀释浓缩液2
2
5
。
保存条件:两者均需4℃避光保存2
2
5
。
检测目标:
转录因子:Foxp3、Nanog、Tbet、Gata-3、Rorγt等1
2
3
。
核蛋白:Ki-67(增殖标记)1
2
3
。
细胞因子:如IL-6、IFN-γ(需注意检测时间窗口)1
3
。
实验场景:
Treg细胞鉴定(CD4⁺Foxp3⁺或CD25⁺Foxp3⁺)3
4
。
肿瘤免疫微环境分析(如T细胞亚群分型)3
4
。
固定与破膜:
将细胞重悬于1X固定液(浓缩液:稀释液=1:3)中,室温孵育20-60分钟4
5
。
破膜液(10X浓缩液稀释至1X)洗涤并离心两次,去除碎片4
5
。
抗体染色:
直接加入推荐浓度的直标一抗(如Anti-Foxp3-PE),室温避光孵育20-60分钟4
5
。
最后用破膜液重悬细胞,上机检测4
5
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注意事项:
固定液含甲醛,需佩戴手套和护目镜2
2
6
。
避免与表面抗体同时染色,建议分步操作4
5
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