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Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set(Cat No.:00-5523-00)

Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set 是一种用于细胞内染色流式细胞分析的产品,产品概述

  • 用途:专为细胞内转录因子(如Foxp3、Ki-67)及核蛋白的流式细胞术检测设计,优化了抗体对目标蛋白的染色效果,同时兼容细胞因子和趋化因子的检测


  • 产品简介

产品组成

  • 成分

    • Fixation/Permeabilization浓缩液(Cat. 00-5123):30 mL,含甲醛和致癌物,需按1:3比例与稀释液混合使用

    • Fixation/Permeabilization稀释液(Cat. 00-5223):100 mL,用于稀释浓缩液

  • 保存条件:两者均需4℃避光保存

核心应用

  • 检测目标

    • 转录因子:Foxp3、Nanog、Tbet、Gata-3、Rorγt等

    • 核蛋白:Ki-67(增殖标记)

    • 细胞因子:如IL-6、IFN-γ(需注意检测时间窗口)

  • 实验场景

    • Treg细胞鉴定(CD4⁺Foxp3⁺或CD25⁺Foxp3⁺)

    • 肿瘤免疫微环境分析(如T细胞亚群分型)

实验步骤要点

  1. 固定与破膜

    • 将细胞重悬于1X固定液(浓缩液:稀释液=1:3)中,室温孵育20-60分钟

    • 破膜液(10X浓缩液稀释至1X)洗涤并离心两次,去除碎片

  2. 抗体染色

    • 直接加入推荐浓度的直标一抗(如Anti-Foxp3-PE),室温避光孵育20-60分钟

    • 最后用破膜液重悬细胞,上机检测

  3. 注意事项

    • 固定液含甲醛,需佩戴手套和护目镜

    • 避免与表面抗体同时染色,建议分步操作


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