产品特性

1. 靶标蛋白 SOX10（SRY-related HMG-box 10）是SOX转录因子家族成员，参与神经嵴细胞分化、周围神经系统发育及黑色素细胞功能调控。其异常表达与神经源性肿瘤（如施万细胞瘤、神经纤维瘤）、黑色素瘤及部分软组织肿瘤相关12。

2. 抗体来源与类型

• 宿主物种：豚鼠（Guinea pig），多克隆抗体（pAb）。

• 反应种属：通常适用于人、小鼠、大鼠等实验动物，具体需参考产品说明书确认。

3. 应用方向

• 免疫组织化学（IHC）：检测组织切片中SOX10的定位（如细胞核或胞质），辅助诊断神经源性肿瘤或评估肿瘤分化状态。

• 免疫印迹（WB）：分析SOX10蛋白在不同样本中的表达水平及分子量（理论分子量约50 kDa）3。

实验应用与优化建议

1. 免疫组织化学（IHC）

• 适用样本：石蜡包埋组织切片（FFPE）或冰冻切片。

• 关键步骤：

• 可搭配HRP标记的抗豚鼠二抗（如兔抗豚鼠IgG-HRP）及DAB显色试剂。

• 初始推荐稀释比例为1:50-1:200，需根据实验结果调整。

• 建议使用含0.3% Triton X-100的抗体稀释液以增强渗透性。

• 推荐使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）或Tris/EDTA缓冲液（pH 9.0）进行高压修复，以暴露SOX10抗原表位4。

• 修复时间：高压121℃下2-3分钟，或微波修复15-20分钟。

1. 抗原修复：

2. 抗体稀释：

3. 检测系统：

• 常见问题及解决方案：

• 延长抗体孵育时间（4℃过夜）或提高抗体浓度。

• 检查抗原修复是否充分。

• 增加封闭步骤（如5%脱脂奶粉或BSA封闭1小时）。

• 优化洗涤条件（TBST洗涤3次，每次5分钟）。

• 背景过高：

• 信号弱：

2. 免疫印迹（WB）

• 样本制备：

• 提取细胞或组织总蛋白，使用含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液，离心后取上清。

• 蛋白定量推荐BCA法，上样量建议20-50 μg/孔。

• 电泳与转膜：

• 使用SDS-PAGE分离蛋白（推荐10%-12%凝胶）。

• 转膜至PVDF膜（甲醇预处理激活膜），湿转法更适用于SOX10（分子量适中）。

• 抗体孵育：

• 一抗稀释比例：1:1000-1:2000，4℃过夜孵育。

• 二抗选择：HRP标记的抗豚鼠IgG，室温孵育1小时。

• 显影：

• 使用ECL化学发光试剂，通过成像仪或X光片显影。

• 若信号弱，可延长曝光时间或增加抗体浓度。