

API溶液(即用型)(Cat No.:BL105B)是一种预先配制好的荧光染料工作液,专用于细胞核或双链DNA的快速染色,广泛应用于细胞生物学、病理学及分子生物学研究。
一、产品特性
成分与浓度
主要成分:DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)为水溶性荧光染料,可直接与双链DNA结合,产生强蓝色荧光(激发波长约358 nm,发射波长约461 nm)。
即用型浓度:通常为10 μg/mL(具体以产品说明书为准),无需稀释即可直接用于染色,简化实验流程。
物理化学性质
荧光特性:与双链DNA结合后荧光强度增强约20倍,对单链DNA或RNA结合较弱,特异性高。
储存稳定性:需避光保存(通常-20℃),避免反复冻融以维持活性,有效期一般为1年。
适用样本类型
贴壁细胞/组织切片:固定后直接滴加DAPI溶液覆盖样本,避光孵育5-10分钟。
悬浮细胞:离心收集细胞后,用DAPI溶液重悬并混匀,避光孵育3-5分钟。
操作流程(通用步骤)
预处理:样本需经固定(如4%多聚甲醛)和洗涤(PBS),去除固定剂或杂质。
染色:加入DAPI溶液,室温避光孵育(时间根据样本类型调整)。
洗涤与封片:用PBS洗涤去除未结合染料,滴加抗荧光淬灭封片液(如甘油-PBS混合液)后盖玻片,荧光显微镜观察。
基础研究
细胞核定位:用于免疫荧光、共聚焦显微镜等实验中,作为细胞核的复染剂,辅助定位其他标记蛋白(如绿色荧光蛋白GFP或红色荧光染料)。
细胞凋亡检测:通过观察细胞核形态变化(如固缩、碎裂)及荧光强度增强,区分正常细胞与凋亡细胞。
临床与转化医学
病理诊断:辅助组织切片中细胞核的形态学分析,如肿瘤细胞增殖活性评估。
药物筛选:结合流式细胞术或高通量成像,评估药物对细胞核结构或DNA含量的影响。
操作安全
DAPI具有细胞毒性及潜在刺激性,需佩戴手套、口罩等防护装备,避免接触皮肤或吸入蒸气。
废液需按有害废弃物处理,不可随意丢弃。
实验优化
染色时间:过长可能导致背景荧光增强,需根据样本类型调整(如薄切片可缩短至3分钟)。
背景控制:染色后需充分洗涤,减少未结合染料的干扰;若需多重荧光标记,优先选择发射光谱无重叠的染料组合。
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