

CY3-Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)(Cat No.:706-165-148) 是一种驴源多克隆二抗,荧光标记为 CY3,专用于检测豚鼠来源的免疫球蛋白(IgG),包括重链(H)和轻链(L)。
一、产品核心特性
宿主与靶标特异性
宿主:驴(Donkey),多克隆抗体(Polyclonal),具有识别多个表位的能力,增强对天然构象蛋白的检测灵敏度。
靶标:针对豚鼠IgG的重链和轻链(H+L),可识别天然及变性条件下的IgG,适用于多种实验体系。
预吸附处理:通过去除与其他物种IgG(如小鼠、大鼠、兔等)的交叉反应成分,显著降低背景信号,提高信噪比。
荧光标记特性
CY3染料:属于花青类荧光染料,激发波长约 550 nm,发射波长约 570 nm,呈现鲜艳的橙红色荧光,与绿色荧光(如FITC)形成鲜明对比,适合多色荧光标记实验。
优势:相比传统荧光素(如FITC),CY3具有更高的光稳定性和抗淬灭性,适合长时间成像或弱信号检测。
免疫荧光(IF/ICC)
用于检测豚鼠来源的一抗在细胞或组织中的定位,例如神经元、免疫细胞等样本中的抗原表达分析。
需配合荧光显微镜或共聚焦显微镜观察,推荐使用550 nm左右的激发光源(如氩离子激光器)。
流式细胞术(Flow Cytometry)
适用于豚鼠来源的细胞样本(如血液、脾脏细胞)的表面或胞内蛋白检测,通过CY3荧光信号快速区分目标细胞群。
稀释与孵育条件
推荐稀释比例:通常为 1:500–1:2000,具体需根据实验体系优化(如样本类型、一抗浓度等)。
孵育时间:室温 1–2小时 或4℃过夜,避免长时间孵育导致非特异性结合。
避光操作:CY3荧光标记需全程避光,以减少淬灭,建议使用避光湿盒或红光安全灯操作。
对照设置
阴性对照:省略一抗或使用同型对照抗体(如驴抗兔IgG),验证背景信号。
单染对照:在多色标记实验中,单独检测每种荧光信号,用于后续光谱拆分分析。
保存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融;分装后可长期稳定。
样本兼容性:适用于固定后的细胞或组织样本,但需注意固定剂选择(如4%多聚甲醛适合大多数抗原,避免使用含醛类的固定液导致自发荧光干扰)。
多色染色优化:若与其他荧光染料(如Alexa Fluor系列)联用,需确保光谱分离度足够,避免串色;建议使用光谱分析软件辅助后期图像处理。
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