Phospho-Rac1/Cdc42 (Ser71) Antibody（Cat No.：CL-PA2461T） 是一种针对 Rac1 和 Cdc42 蛋白在丝氨酸71位点（Ser71）磷酸化状态 的高特异性多克隆抗体，广泛应用于研究 Rho GTP酶家族成员的信号调控机制，尤其在细胞迁移、肿瘤侵袭及免疫调控等过程中具有重要价值。
一、抗体特性与设计
宿主与类型
宿主：兔（Rabbit），多克隆抗体（Polyclonal Antibody），通过免疫兔源动物获得针对磷酸化 Ser71 位点的抗体，具有识别多个表位的能力，适合检测天然构象或变性条件下的磷酸化蛋白。
特异性：特异性识别 Rac1 和 Cdc42 在 Ser71 位点的磷酸化形式（p-Ser71），对非磷酸化形式无交叉反应，避免假阳性信号。
免疫原与靶标
Rac1：Rho 家族小 GTP 酶，调控细胞骨架重组、细胞迁移及肿瘤侵袭。
Cdc42：与 Rac1 结构相似，参与细胞极性形成、有丝分裂及信号转导，两者常协同作用。
免疫原：通常基于合成肽段（如 Rac1/Cdc42 的 Ser71 周围磷酸化序列）设计，经 KLH 偶联后免疫动物，确保抗体对磷酸化修饰的高度敏感性。
靶标蛋白：
功能意义
磷酸化调控：Ser71 位点的磷酸化是 Rac1/Cdc42 活性调控的关键事件，影响其与下游效应分子（如 PAK、WAVE 复合物）的相互作用，进而调节细胞运动、黏附及增殖。
该抗体适用于多种实验技术，推荐条件如下：
| Western Blot (WB) | 1:1000–1:5000 | 使用含 SDS-PAGE 分离胶（建议 10%–12%），转膜后封闭（5% 脱脂牛奶或 BSA），4℃ 孵育过夜以增强信号。 |
| 免疫组化 (IHC) | 1:200–1:1000 | 适用于石蜡切片或冰冻切片，需结合抗原修复（如柠檬酸缓冲液热修复）以暴露磷酸化表位。 |
| 免疫荧光 (IF) | 1:100–1:500 | 细胞固定（4% 多聚甲醛），封闭后避光孵育，推荐与 DAPI 共染以定位细胞核，使用 CY3 或 Alexa Fluor 等荧光标记二抗检测信号。 |
样本处理
蛋白提取：使用含磷酸酶抑制剂（如 Na₃VO₄、β-甘油磷酸钠）的裂解液，避免磷酸化状态丢失。
组织样本：石蜡切片需脱蜡至水，冰冻切片需避免反复冻融；建议新鲜制备或低温保存以减少蛋白降解。
实验条件优化
抗体浓度：建议梯度稀释（如 1:1000、1:2000、1:5000）以确定最佳工作浓度，避免高浓度背景信号。
封闭与洗涤：充分封闭（30 分钟以上）并多次洗涤（TBST 洗 3 次，每次 5 分钟），减少非特异性结合。
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