

品牌与型号:李记生物(Lijitek)的脂质体转染试剂,货号AC04L072。
应用领域:适用于真核细胞的核酸(DNA、RNA、siRNA等)转染,支持贴壁细胞、悬浮细胞及基因敲除实验1
。
特点:
高转染效率:与进口试剂(如Lipofectamine 2000/3000)性能相当或更优1
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。
低细胞毒性:优化配方减少对细胞的损伤,适合长期实验1
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。
广谱适用性:兼容难转染细胞(如HeLa、HEK293T、原代细胞等)4
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。
转染条件:
细胞密度:建议转染时细胞汇合度70%-90%,活细胞率>90%1
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复合物制备:需使用无血清培养基(如MEM)稀释核酸和试剂,室温静置20-30分钟1
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。
用量参考:
DNA用量:0.1-4 μg/孔(24孔板),试剂用量通常为DNA体积的1:2-1:31
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示例:0.5 μg DNA + 1-1.5 μL试剂(24孔板)。
使用流程
细胞准备:
转染前1天铺板,确保转染当天细胞密度适中(如293T细胞3.0×10⁵ cells/mL)1
。
复合物制备:
步骤1:稀释DNA(如0.2 μg)和转染试剂(如0.15 μL)于无血清培养基中,混合均匀1
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。
步骤2:室温静置20-30分钟形成复合物1
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。
转染操作:
将复合物逐滴加入细胞培养基,轻柔混匀,无需换液1
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。
检测:
转染后1-3天检测基因表达(如荧光蛋白或Western blot)1
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保存条件:蓝冰运输,4℃避光保存,有效期12个月1
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优化建议:
首次使用需优化DNA与试剂比例(如1:0.5-1:5)3
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避免使用含抗生素的培养基,转染前后可换液以减少毒性3
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。
毒性控制:
高浓度试剂可能增加细胞损伤,建议通过预实验确定最佳用量7
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