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复合消化液(Cat No.:I016-1-1)

产品概述

  • 核心功能:专为细胞消化设计,用于分离组织或细胞团中的单个细胞,适用于原代细胞培养、细胞悬液制备等实验。

  • 典型成分

    • 胰蛋白酶:水解细胞间质中的蛋白质,松解细胞连接。

    • EDTA:螯合钙离子,破坏细胞间钙依赖性粘附(如钙黏蛋白)。

    • 缓冲体系:维持pH稳定(通常pH 7.4),减少细胞损伤。

    • 可能添加成分:抗生素(如青霉素/链霉素)或血清(如胎牛血清)以保护细胞活性。

  • 规格与储存

    • 常见规格:100ml/瓶(需根据实验需求稀释)。

    • 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融;开封后建议分装并4℃保存,1个月内用完。


  • 产品简介

操作步骤与注意事项

标准消化流程

  1. 样本准备

    • 组织块剪碎至1-2mm³,或直接处理细胞聚集体。

    • 用无钙镁缓冲液(如PBS)洗涤去除残留培养基。

  2. 消化液配制

    • 按说明书稀释(如1:100稀释至工作浓度),部分产品需添加血清(如5-10% FBS)以保护细胞。

  3. 消化处理

    • 将样本与消化液混合,37℃孵育5-30分钟(时间根据组织硬度调整)。

    • 每5分钟轻柔震荡,避免细胞过度消化。

  4. 终止消化

    • 加入含血清的培养基终止反应,离心(300×g,5分钟)去除消化液。

    • 重悬细胞,过筛(如40μm细胞滤网)去除未消化组织块。

  5. 后续处理

    • 细胞计数后接种至培养基中,或用于流式分选、单细胞测序等实验。

关键注意事项

  1. 消化时间控制

    • 时间过短导致消化不完全,残留细胞团;时间过长引发细胞死亡或损伤。

    • 建议通过预实验优化时间(如不同组织类型差异显著)。

  2. 成分调整

    • 若消化效果不佳,可尝试提高消化液浓度、延长孵育时间,或联合机械研磨(如移液枪吹打)。

    • 敏感细胞需减少EDTA浓度或缩短孵育时间。

  3. 细胞活性保护

    • 加入血清或含BSA的缓冲液可减少细胞应激。

    • 消化后立即终止反应并离心,避免细胞长时间暴露于消化液。

  4. 污染风险

    • 操作需在无菌条件下进行,避免微生物污染。


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