

核心功能:专为细胞消化设计,用于分离组织或细胞团中的单个细胞,适用于原代细胞培养、细胞悬液制备等实验。
典型成分:
胰蛋白酶:水解细胞间质中的蛋白质,松解细胞连接。
EDTA:螯合钙离子,破坏细胞间钙依赖性粘附(如钙黏蛋白)。
缓冲体系:维持pH稳定(通常pH 7.4),减少细胞损伤。
可能添加成分:抗生素(如青霉素/链霉素)或血清(如胎牛血清)以保护细胞活性。
规格与储存:
常见规格:100ml/瓶(需根据实验需求稀释)。
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融;开封后建议分装并4℃保存,1个月内用完。
样本准备:
组织块剪碎至1-2mm³,或直接处理细胞聚集体。
用无钙镁缓冲液(如PBS)洗涤去除残留培养基。
消化液配制:
按说明书稀释(如1:100稀释至工作浓度),部分产品需添加血清(如5-10% FBS)以保护细胞。
消化处理:
将样本与消化液混合,37℃孵育5-30分钟(时间根据组织硬度调整)。
每5分钟轻柔震荡,避免细胞过度消化。
终止消化:
加入含血清的培养基终止反应,离心(300×g,5分钟)去除消化液。
重悬细胞,过筛(如40μm细胞滤网)去除未消化组织块。
后续处理:
细胞计数后接种至培养基中,或用于流式分选、单细胞测序等实验。
消化时间控制:
时间过短导致消化不完全,残留细胞团;时间过长引发细胞死亡或损伤。
建议通过预实验优化时间(如不同组织类型差异显著)。
成分调整:
若消化效果不佳,可尝试提高消化液浓度、延长孵育时间,或联合机械研磨(如移液枪吹打)。
敏感细胞需减少EDTA浓度或缩短孵育时间。
细胞活性保护:
加入血清或含BSA的缓冲液可减少细胞应激。
消化后立即终止反应并离心,避免细胞长时间暴露于消化液。
污染风险:
操作需在无菌条件下进行,避免微生物污染。
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