使用方法

1. 样本准备

• 固定细胞/组织：使用4%多聚甲醛等固定剂处理样本，洗涤去除固定剂残留。

• 透化处理（可选）：若需进行免疫荧光染色，需先用0.1% Triton X-100等透化剂处理细胞膜。

2. DAPI染色步骤

1. 染色：

• 贴壁细胞或组织切片：滴加足量DAPI溶液覆盖样本，室温孵育3-5分钟。

• 悬浮细胞：加入3倍体积的DAPI溶液，混匀后室温孵育3-5分钟。

2. 洗涤：用PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟，去除未结合的染料。

3. 封片与观察：

• 加抗荧光淬灭封片液（如ProLong™ Diamond）封片，避免荧光衰减。

• 使用荧光显微镜，选择360nm激发波长和460nm发射滤光片观察蓝色荧光细胞核。

注意事项

1. 安全性

• DAPI被普遍认为具有潜在致癌性，操作时需佩戴手套、护目镜，避免直接接触或吸入。

• 废弃物需按生物危险品处理，避免污染环境。

2. 荧光稳定性

• 荧光染料易淬灭，建议染色后当天完成观察；若需长期保存，使用抗淬灭封片液。

3. 样本兼容性

• 活细胞染色需提高浓度（如10-50μg/mL），但可能影响细胞活性；推荐用于固定细胞1。

• 避免与含叠氮化钠的试剂联用，可能淬灭荧光。

保存与稳定性

• 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期通常为1年。

• 开封后使用：建议分装后使用，开封后4℃避光保存，1个月内用完。