5×蛋白上样液（Cat No.：BL502A）是一种专为SDS-PAGE电泳设计的浓缩型缓冲液，主要用于蛋白质样品的变性、还原及电泳上样。其核心功能是通过化学成分协同作用，使蛋白质充分解聚并均匀迁移，便于后续电泳分离和检测。
一、产品核心特性
成分与功能 5×蛋白上样液（BL502A）通常包含以下关键组分：
SDS（十二烷基硫酸钠）：作为阴离子去垢剂，破坏蛋白质的疏水相互作用，使蛋白质完全变性并赋予均匀的负电荷，确保迁移速率仅由分子量决定。
还原剂（如DTT或β-巯基乙醇）：断裂蛋白质链内及链间的二硫键，使多亚基蛋白解离为单体，确保电泳分离的准确性。
甘油（25%）：增加样品密度，帮助蛋白质溶液沉入凝胶加样孔，避免扩散。
溴酚蓝指示剂：作为电泳进程的可视化标记，指示蛋白质迁移至凝胶底部的终点。
Tris-HCl缓冲体系：维持电泳过程中的pH稳定，确保SDS和蛋白质的稳定性。
优势特点
高效变性与还原：通过SDS和还原剂的协同作用，快速实现蛋白质的完全变性，适用于复杂样品（如细胞裂解液、组织匀浆液）的预处理。
便捷浓缩设计：5倍浓缩配方减少储存体积，使用时按比例稀释即可，节省实验耗材和操作时间。
广泛兼容性：适用于常规SDS-PAGE电泳，支持后续Western Blot、免疫印迹等下游分析。
常规SDS-PAGE电泳 用于分离不同分子量的蛋白质，常用于蛋白质纯度检测、分子量测定及Western Blot前的预分离步骤。
蛋白样品预处理 适用于需变性还原的蛋白质样品（如细胞总蛋白、重组蛋白），尤其在处理含有二硫键的多亚基蛋白或膜蛋白时效果显著。
样品制备
按 1:4体积比 将蛋白样品与5×上样液混合（例如：5μL样品 + 20μL上样液）。
轻柔混匀后，短暂离心（如1000×g，1分钟）去除气泡。
加热变性
将混合液置于 95-100℃金属浴或沸水浴中加热5-10分钟，使蛋白质完全变性。
冷却至室温后上样，避免高温损伤凝胶孔。
电泳条件
浓缩胶（5%）：电压 80-100 V，待溴酚蓝进入分离胶后切换至分离胶条件。
分离胶（8-12%）：电压 120-150 V，直至溴酚蓝迁移至凝胶底部附近停止电泳。
储存与稳定性
未开封时建议 -20℃避光保存，有效期通常为1年。
避免反复冻融，分装后使用更佳。
操作细节
混合均匀：确保样品与上样液充分混匀，避免局部浓度过高导致条带拖尾。
上样量控制：根据凝胶孔容量调整体积（通常每孔不超过20-30μL），过量可能溢出或影响分辨率。
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